347 rozsdamentes acél kémiai összetétele A SARS-CoV-2-re jellemző vénás vagy kapilláris vér nagysága határozza meg a COVID-19 elleni immunitást.

Köszönjük, hogy meglátogatta a Nature.com oldalt.Olyan böngészőverziót használ, amely korlátozott CSS-támogatással rendelkezik.A legjobb élmény érdekében javasoljuk, hogy használjon frissített böngészőt (vagy tiltsa le a kompatibilitási módot az Internet Explorerben).Ezenkívül a folyamatos támogatás érdekében stílusok és JavaScript nélkül jelenítjük meg az oldalt.
Diánként három cikket mutató csúszkák.Használja a vissza és a következő gombokat a diák közötti mozgáshoz, vagy a végén lévő diavezérlő gombokat az egyes diák közötti mozgáshoz.

347 rozsdamentes acél kémiai összetétele

Rozsdamentes acél 347 tekercscső kémiai összetétele

A rozsdamentes acél 347 tekercscső kémiai összetétele és mechanikai tulajdonságai a következők:
- Szén – 0,030% max
- króm – 17-19%
- Nikkel – 8-10,5%
- Mangán – max. 1%

Rozsdamentes acél 347 tekercscső mechanikai tulajdonságai

A rozsdamentes acél 347 tekercscső gyártója szerint a 347 tekercscső mechanikai tulajdonságai:
- Szakítószilárdság (psi) – 75 000 perc
- Hozamerő (psi) – 30 000 perc
- Megnyúlás (% in 2″) – 25% min
- Brinell keménység (BHN) – 170 max

A rozsdamentes acél 347 tekercscső alkalmazásai és felhasználási területei

• Rozsdamentes acél 347 tekercscső, amelyet a cukorgyárakban használnak.
• A műtrágyában használt rozsdamentes acél 347 tekercscső.
• Az iparban használt rozsdamentes acél 347 tekercscső.
• Erőművekben használt rozsdamentes acél 347 tekercscső.
• Rozsdamentes acél 347 tekercscső, amelyet élelmiszerekben és tejiparban használnak.
• Olaj- és gázüzemben használt rozsdamentes acél 347 tekercscső.
• A hajóépítő iparban használt rozsdamentes acél 347 tekercscső gyártója.

Úgy gondolják, hogy a SARS-CoV-2-specifikus T-sejtek védelmet nyújtanak a fertőzés és a COVID-19 progressziója ellen, de erre nincs közvetlen bizonyíték.Itt összehasonlítottuk a SARS-CoV-2-specifikus interferon-γ pozitív T-sejtek teljes vérmérését a pozitív COVID-19 diagnosztikai teszteredményekkel (PCR és/vagy laterális áramlás) Lian vérvételét követő 6 hónapon belül.A vénás vérmintákat adományozó 148 résztvevő közül a SARS-CoV-2-specifikus T-sejtes válasz nagysága szignifikánsan magasabb volt azoknál, akik védettek maradtak, mint a fertőzötteknél (P < 0,0001).%-os fertőzésveszély, míg a magas intenzitás 5,4%-ra csökkentette ezt a kockázatot.Ezeket az eredményeket további 299 résztvevőre általánosították, akik egy méretezhető kapilláris vérvizsgálatot teszteltek, amely megkönnyítette a populáció léptékű T-sejt immunitási adataihoz való hozzáférést (14,9% vs. 4,4%).Így a SARS-CoV-2-re specifikus T-sejtek mérése előre jelezheti a fertőzés kockázatát, és ezt értékelni kell az egyén és a populáció immunállapotának monitorozásakor.
A SARS-CoV-2 fertőzésre adott immunválasz mérése és megértése fontos hatékony jövőbeli stratégiák kidolgozásához a jövőbeni COVID-19-járványok közegészségügyi és gazdasági hatásainak minimalizálására.Az immunkorrelátumok azonosítása fontos információkkal szolgál a lakosság vírusfertőzésekkel szembeni fogékonyságáról, esetleg korai figyelmeztetést jelent a kórházi kezelések csúcspontjaira, és lehetővé teszi az emberek számára, hogy személyesen kezeljék fertőzési kockázatukat és mások megfertőzésének kockázatát.Az immunrendszer felügyelete kritikusnak bizonyult a COVID-19 vakcinák hatékonyságának értékelése szempontjából egészséges és magas kockázatú betegeknél1,2,3, különösen a SARS-CoV-24 mutánsok esetében, és az immunhiányosak kimutatása azt jelenti, hogy fokozni kell az immunitást. Oltasson be és megelőzze. jövőbeli járványok.
Az egyén SARS-CoV-2 fertőzéssel szembeni immunitásának szintje több tényezőtől függ: a vírusterhelés az expozíció időpontjában, a vírusváltozatok, az életkor, a korábbi oltás/fertőzöttség állapota, társbetegségek, gyógyszerek, és ami a legfontosabb, a SARS-CoV elleni fertőzés. .2 adaptív immunválasz a vírussal való érintkezés időpontjában lép fel5.A SARS-CoV-2 fertőzésre és/vagy vakcinációra adott immunválasz értékelése olyan szerológiai vizsgálatokra összpontosított, amelyek egy szerkezeti fehérjére (pl. tüske glikoproteinre) specifikus antitestek jelenlétét mérik.Az antitestek jelenléte vagy hiánya azonban önmagában nem határozza meg pontosan a védő immunválaszt, mivel a válaszok jelentősen gyengülnek az idő múlásával6 és a SARS-CoV-2 variánsok semlegesítése felépülő vagy kétszer vakcinázott egyénekben. áttöréses fertőzések száma7.Valójában az Omicron variáns (B.1.1.529) által okozott tünetekkel járó COVID-19 elleni védelem mindössze 4–6 hónapos mRNS-oltás után körülbelül 10%-ra csökkent, bár a súlyos betegség elleni védelem legalább 7 hónapig több mint 68% volt8.Az adaptív memória T-sejtes válaszok mérése, amelyek hosszú távú védelmet biztosítanak a vírusfertőzés ellen, a legjobb indikátora a SARS-CoV-2 fertőzésre való fogékonyságnak, és így jobban jelzi a COVID-199 pozitív tesztjének kockázatát, mivel a specifikus T a sejtek megakadályozhatják a fertőzést.szerokonverzió nélkül10,11.A T-sejtes válaszok mérése azonban kevesebb figyelmet kapott a vénás vérminták beszerzésének és szállításának módszertani nehézségei és logisztikai problémái miatt, különösen a vakcina hatékonyságának felmérése és az immunitás monitorozása céljából végzett nagy megfigyelési vizsgálatok során.A beoltott egyének azonban erőteljes T-sejt-aktivitást mutatnak a SARS-CoV-2 variánsokkal szemben, ami potenciálisan ellensúlyozza az antitest-reaktivitás elvesztését, és korlátozza a COVID-1912,13 súlyosságát.
Itt azt próbáltuk megérteni, hogy a SARS-CoV-2 T-sejtes válasz egyetlen mérése előre jelezheti-e a SARS-CoV-2 fertőzés abszolút kockázatát a vérvételt követő 6 hónapon belül, függetlenül a korábbi immunrendszert befolyásoló tényezőktől.Annak érdekében, hogy a T-sejt-teszt nagy áteresztőképességű és nagyobb vizsgálatokra is alkalmazható legyen, a tesztet igyekeztünk miniatürizálni, hogy az ujjbegy kapilláris vérmintával is elvégezhető legyen.
Egészséges donorok sejtes és humorális immunválaszait mértük a SARS-CoV-2 T-sejtek és IgG antitestek teljes vénás vér alapján történő kombinált kimutatásával (a résztvevők jellemzőit lásd: 2022. március 14. Vakcinált donoroknál a SARS-CoV-2- A specifikus T-sejtes válaszokat a plazma interferon-γ (IFN-γ) szintjének mérésével határoztuk meg SARS-CoV-2 peptiddel történő teljes vér stimulációt követően (ahogyan korábban, 14, 15, 16, 17, 18), és a kapcsolódó IgG válaszokat. nukleokapsziddal (N) megnövekedett azoknál, akik korábbi fertőzésről számoltak be, bár mindkét válasz magasabb volt a korábban fertőzött, be nem oltott donoroknál, maximális a szervezetben (1a, b ábra). A tüske glikoproteinek (RBD, S1, S2) elleni IgG válaszok A korábban fertőzött, beoltott donoroknál volt a legmagasabb (1c–e ábra).
a SARS-CoV-2-specifikus IFN-γ+ T-sejt válaszokat vénás teljes vérvizsgálattal mértük, és a résztvevők oltásai és korábbi SARS-CoV-2 fertőzési státusza alapján (PCR-rel és/vagy laterális áramlási teszttel megerősítve)” Vac. + /Inf +' n = 60 (zöld), "Vac + /Inf-" n = 82 (kék), "Vac-/Inf +" n = 4 (sárga), "Vac-/Inf-" n = 1 (nincs alkalmazva).A SARS-CoV-2-specifikus IgG-kötő reakciók a nukleokapszidot („N”) célozzák (b; ****P < 0,0001, **P = 0,0016), a tüskés receptorkötő domént („RBD”) (c; ** P = 0,0022, *P < 0,015), 1. tüske alegység („S1”) (d; ***P = 0,0005, *(Vac + /Inf+ vs. Vac + /Inf-) P = 0,022, *(Vac-) /Inf+ vs. Vac+/Inf-) P = 0,012) és a 2. csúcs alegységet („S2”) (e) vénás teljes vérvizsgálattal mérték, és a résztvevők oltása és a korábbi SARS -CoV-2 alapján (PCR és/ vagy laterális áramlási teszt) fertőző állapot."Vac + /Inf +" n = 60 (zöld), "Vac + /Inf-" n = 71-82 (kék), "Vac-/Inf +" n = 4 (sárga).Az összehasonlításokat a Kruskal-Wallis teszttel végeztük, amelyet többszörös összehasonlításra a Dunn-teszttel korrigáltunk.Az adatok diagramok formájában jelennek meg (középvonal a mediánnál, felső határ a 75. percentilisnél, alsó határ a 25. percentilisnél), a minimális és maximális értékeken habarcsokkal.Minden pont egy donort jelöl.A nyers adatok nyers adatfájlok formájában állnak rendelkezésre.
Vérmintavétel után a résztvevőket arra kérték, hogy maguk jelentsék be a COVID-19 pozitív PCR és/vagy laterális áramlási teszt eredményeit;ha a résztvevők tesztje 2021. szeptember 1. és 2021. december 29. között pozitív volt, feltételezhető volt, hogy 2021. december 29. után fertőzöttek Delta (B.1.617.2) koronavírus és Omicron (B.1.1.529) variánssal. ez az aggodalomra okot adó lehetőség válik uralkodóvá.148 értékelhető donor között 26,3%-os (39/148) fertőzési arányt figyeltünk meg a véradást követő 6 hónapon belül, közülük 38-an kaptak második vagy harmadik adag COVID-19 oltást (a fertőzés áttörése a Pfizer/BioNTech után következett be. BNT162b2) mRNS vakcina vagy AstraZeneca vakcina (ChAdOx1 nCoV-19));egy be nem oltott donor is megfertőződött.A SARS-CoV-2-specifikus IFN-γ-pozitív T-sejt-válaszok nagysága szignifikánsan alacsonyabb volt azoknál, akik pozitív diagnosztikai tesztet jelentettek COVID-19-re, mint a nem fertőzött donoroknál (P < 0,0001; 2a ábra), elsősorban a következők miatt: a T-sejtes válaszok optimális indukálása oltással egyes résztvevőknél (P = 0,050; Kiegészítő 1. ábra).Nem volt összefüggés az IFN-γ+ T-sejtes válasz nagysága és a pozitív COVID-19 teszteredményig eltelt idő között (2. kiegészítő ábra).Ezzel szemben sem az RBD-, S1-, S2-kötő IgG-válaszok (2b–d. ábrák), sem az RBD-, S1-neutralizáló antitest-válaszok nem voltak specifikusak a vad típusú vagy delta SARS-CoV-2-re (B.1.617).) (3. kiegészítő ábra) különbséget tud tenni a fertőzés kockázatának kitett emberek között.A SARS-CoV-2 elleni alacsony N-kapcsolt IgG válasz azonban korrelált a COVID-19 fertőzés kockázatával (P = 0,0084; 2e ábra);azok, akiknél pozitív lett, 85%-kal kisebb valószínűséggel jártak (P = 0,00035; OR 0,15, 95).% CI: 0,047–0,39 (4. kiegészítő ábra).
Egészséges donoroktól (n = 148) vett vénás vérminták értékelték a SARS-CoV-2-specifikus IFN-γ+ T-sejt válaszokat (a; ****P < 0,0001) és a Spike-receptor kötődését a specifikus SARS-CoV-hoz -2 inger.domén („RBD”) (b), tüske 1. alegység („S1”) (c), 2. tüske alegység („S2”) (d) és nukleokapszid („N”) (e; **P = 0,0084 ) .Azon résztvevők azonosítása, akiknek COVID-19-tesztje (PCR és/vagy oldalirányú áramlás) pozitív lett;minden fertőzés a vérvételt követő 6 hónapon belül történt.Az összehasonlításokat kétirányú Mann-Whitney teszttel végeztük.Az adatok diagramok formájában jelennek meg (középvonal a mediánnál, felső határ a 75. percentilisnél, alsó határ a 25. percentilisnél), a minimális és maximális értékeken habarcsokkal.Minden pont egy donort jelöl.ns nem fontos.Az f hőtérkép a Spearman-féle rangkorrelációkat mutatja a megadott adatkészlet változói között.A statisztikailag nem szignifikáns összehasonlításokat kizártuk a mátrixból, és üres cellákkal jelöltük.A nyers adatok nyers adatfájlok formájában állnak rendelkezésre.
Az előre beállított 14-es diagnosztikai pozitív határérték túl önkényesnek bizonyult az újrafertőződés kockázatának felméréséhez, ezért interkvartilis tartományokat állítottunk fel az abszolút kockázati paraméterek megállapítására.A statisztikai modell, amely csak az eredményeket szignifikánsan befolyásoló változókat tartalmazta, azt mutatta, hogy a SARS-CoV-2-specifikus IFN-γ+ T-sejt-válasz nagysága volt a legfontosabb immunbiomarker az egyén esélyének meghatározásához COVID-re tesztelve.-19 pozitív (2f ábra és 4. kiegészítő ábra).A harmadik (194-489 pg/ml IFN-γ) és a negyedik (>489 pg/ml IFN-γ) kvartilisben SARS-CoV-2 specifikus IFN-γ+ T-sejt-választ mutató betegek 65% (P = 0,055; VAGY 0,35, 95%-os CI: 0,11–1,00) és 90%-ban (P = 0,0050; VAGY 0,098, 95% CI: 0,014–0,42) több résztvevő volt.Ennek kicsi az esélye (4. kiegészítő ábra).Összességében azoknál a résztvevőknél, akiknél a SARS-CoV-2 specifikus T-sejtes válasz a vénás vérből ≤79 pg/ml IFN-γ volt, 43,2%-os volt az áttöréses fertőzés kockázata 6 hónap után, szemben a 489 pg/ml feletti válasszal.ml IFN-γ esetében a fertőzés kockázata 5,4% volt (2. táblázat).
A vénás teljes vérvizsgálat hatóköre korlátozott, mivel a phlebotomistól kell mintát venni.A SARS-CoV-2 T-sejt- és IgG-tesztjének elérhetőségének növelése érdekében egy alternatív kapilláris vérmintavételi módszert fejlesztettek ki, amely lehetővé teszi a résztvevők számára, hogy otthoni ujjbegyből vérmintát vegyenek.Legjobb tudomásunk szerint korábban nem érkezett jelentés az antigén-specifikus T-sejt-funkció méréséről kapilláris vérmintákban.Az összehasonlítható kapilláris és vénás vérminták segítségével kapott limfocitaszámok között korábban erős korrelációt mutattak ki.Ezenkívül arról számoltak be, hogy a SARS-CoV-2-specifikus T-sejt-válaszokat mérő, teljes vér alapú vizsgálatok csak 320 μl vénás vért használnak fel,20 kiküszöbölve a kapilláris vérmintákban előforduló progenitor T-sejtek gyakoriságával kapcsolatos aggályokat.
A SARS-CoV-2 T-sejtek és IgG-antitestek nagy áteresztőképességű, kapilláris teljes véren alapuló, szabványos kollaboratív vizsgálatát használtuk a celluláris és humorális immunválasz mérésére különböző társbetegségekkel és előzetes oltási/fertőzöttségi állapottal rendelkező résztvevőknél (1. táblázat).2022. január 24. és március 14. között az Egyesült Királyságból toboroztak14. Az ujjminták többségét (90,9%) helyesen vették, és a begyűjtést követő 24 órán belül elküldték a laboratóriumba.Egyes esetekben a minták a vérvételt követő 48 órán belül megérkeztek, de ezek egyike sem ment át a minőség-ellenőrzésen, és nem befolyásolta a teljes T-sejt- vagy antitest-méréseket (5. kiegészítő ábra).Bár egyes egyéneknél különbségek voltak a SARS-CoV-2-specifikus IFN-γ+ T-sejt-válasz mértékében a megfelelő kapilláris és vénás vérmintákban mérve, összességében nem volt szignifikáns különbség (P = 0,88; kiegészítő 6. ábra). ).).
A SARS-CoV-2-specifikus IFN-γ+ T-sejt-válaszok szignifikánsan megnövekedtek azoknál a beoltott egyedeknél, akik korábban fertőzésről is beszámoltak (P = 0,0001), de nem szignifikánsan magasabbak, mint a korábban fertőzött, be nem oltott donor egyéneknél (P = 0,19, 1. ábra). 3a).).A tüske glikoprotein (RBD, S1, S2) elleni IgG válaszok szignifikánsan magasabbak voltak a beoltott donorokban, mint a be nem oltott donorokban, függetlenül a korábbi fertőzési állapottól (3b-d ábra).Érdekes módon az átlagos N-kötött IgG válasz a korábban fertőzött, nem oltott résztvevőknél volt a legmagasabb a beoltott résztvevőkkel összehasonlítva, bár ez nem érte el a szignifikanciát (3e. ábra).A be nem oltott és nem fertőzött donorok közül, akik önmagukat bevallották, 37 résztvevőből 15 (40,5%) volt pozitív N-kapcsolt IgG-re, ami meghaladja a korábban megállapított 2,0 BAU/mL14 küszöböt;ez a 15 résztvevő A betegek közül 12 pozitív IFN-γ+ T-sejtes választ mutatott a korábban megállapított 22,7 pg/ml IFN-γ14 küszöb felett.Ezért valószínű, hogy ezek a résztvevők korábban SARS-CoV-2 fertőzöttek voltak, és személyes döntésük, a PCR és/vagy oldalirányú áramlási eszközök hiánya miatt nem tesztelték őket COVID-19-re, vagy tünetmentesek voltak.Bár szignifikáns korreláció volt az IFN-γ+-ra adott T-sejt-válaszok és az N-kapcsolt IgG-szintek között a be nem oltott donorokban (P = 0,0044; Kiegészítő ábra, az N-kapcsolt IgG-válasz gyorsabban csökkent, mint az N-kapcsolt IgG-válasz, míg az IFN-γ + A T-sejtes válaszok a vakcinázási státusztól függetlenül megmaradtak, bár a donorok száma a fertőzés utáni 50. héttel alacsony volt (8. kiegészítő ábra). A vakcinázás típusa általában alig különbözött a SARS-CoV-2, T-re specifikus megfigyelt IgG válaszoktól. sejtekkel és RBD-vel kapcsolatos, bár azok a résztvevők, akik két adag BNT162b2-t, majd mRNS1273 revakcinációt kaptak, szignifikánsan magasabb szintű IFN-γ + T-sejteket mutattak érzékenyebbek a SARS-CoV-2-re, mint azok, akik két adag ChAdOx1-et és BNT162b2-t kaptak (kiegészítő 9. ábra Ezen túlmenően a jelentett társbetegségek összességében csekély eltérést mutattak a megfigyelt T-sejtes válaszokban az egészséges donorokhoz képest (10. kiegészítő ábra).
A SARS-CoV-2-specifikus IFN-γ+ T-sejt válaszokat teljes vér kapilláris vizsgálattal mérték, és a résztvevők oltásain és korábbi SARS-CoV-2 fertőző státuszán alapultak (PCR és/vagy laterális áramlási teszt igazolta)."Vac + /Inf +" n = 42 (zöld), "Vac + /Inf-" n = 158 (kék), "Vac-/Inf +" n = 33 (sárga), "Vac- /Inf-" n = 37 (szürke).****P < 0,0001, ***P = 0,0001, *(Vac+/Inf- vs. Vac-/Inf-) P = 0,045, *(Vac-/Inf+ vs. Vac-/Inf-) P = 0,014 .SARS-CoV-2 specifikus IgG-kötő reakciók a tüskereceptor-kötő doménhez („RBD”) (b; ****P < 0,0001, ns: nem szignifikáns), tüske 1. alegység („S1”) (c; * * **P < 0,0001, ns: nem szignifikáns), 2. tüske alegység ("S2") (d; ****P < 0,0001, ***P = 0,0005, *P = 0,016) és nukleokapszid ("N") (e; ****P < 0,0001, ns nem szignifikáns) vénás teljesvér-analízissel, a résztvevők oltásai és a korábbi SARS-CoV-2 alapján (PCR és/vagy laterális áramlási analízis erősítette meg) A fertőzéseket a következők szerint osztották fel: állapot."Vac + /Inf +" n = 46 (zöld), "Vac + /Inf-" n = 182 (kék), "Vac-/Inf +" n = 34 (sárga), "Vac-/Inf-" n = 37 (szürke).Az összehasonlításokat a Kruskal-Wallis teszttel végeztük, amelyet többszörös összehasonlításra a Dunn-teszttel korrigáltunk.Az adatok diagramok formájában jelennek meg (középvonal a mediánnál, felső határ a 75. percentilisnél, alsó határ a 25. percentilisnél), a minimális és maximális értékeken habarcsokkal.Minden pont egy donort jelöl.A nyers adatok nyers adatfájlok formájában állnak rendelkezésre.
A korábbiakhoz hasonlóan a résztvevőket arra kérték, hogy jelentsék a COVID-19 pozitív PCR és/vagy oldalirányú véráramlási eredményeit;Az Egyesült Királyság Egészségügyi Ügynöksége szerint a résztvevőkről azt feltételezték, hogy fertőzöttek voltak az Omicron koronavírussal (B.1.1.529) a pozitív vírusváltozat tesztelésekor, mivel ez volt a domináns variáns az Egyesült Királyságban a vizsgált időszakban.299 értékelhető donor között 8,0%-os (24/299) fertőzési arányt figyeltünk meg a kapilláris adományozást követő három hónapon belül, ebből hét nem volt beoltva.A társbetegségek aránya az összes résztvevő között alacsonyabb volt a COVID-19-re pozitív tesztet végzőknél (10,7%), mint azoknál, akiknél a COVID-19 teszt negatív (24,4%, 1. táblázat), ami annak tudható be, hogy bizonyos betegeknél a betegségek óvatosabbak és védenek az olyan lehetséges következményektől, mint a cukorbetegség és a rák.Amint azt egy vénás vér kohorszában megfigyelték, a SARS-CoV-2-specifikus interferon-γ (IFN-γ)-pozitív T-sejteket olyan személyek kapilláris vérmintáiban mérték, akik pozitív diagnosztikai tesztet jelentettek COVID-19-re.A válasz nagysága szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a nem fertőzött donoroké (P = 0,034; 4a ábra), mivel viszonylag gyenge a T-sejt-válasz indukálása vakcinázással és/vagy korábbi fertőzéssel (11. kiegészítő ábra).Hasonlóképpen, sem az RBD-, S1-, S2-kötő IgG-válaszok (4b–d. ábrák), sem az RBD-, S1-neutralizáló antitest-válaszok nem voltak specifikusak a vad típusú vagy delta SARS-CoV-2-re (B. 1.617).(12. kiegészítő ábra).A fertőzés jelentős kockázatának kitett személyek azonosíthatók.A vénás kohorttal ellentétben az N-hez kapcsolódó IgG válaszok szintén nem különböztetik meg a COVID-19 kockázatát (4e. ábra), ami arra utal, hogy az Omicron variáns (B.1.1.529) fokozza az immunelkerülést a korábban fertőzött egyénekben, amint azt a közelmúltban leírták 21. Ezzel szemben a SARS-CoV-2-specifikus IFN-γ T-sejt-válasz erőssége ismét a legfontosabb változó volt a COVID-19-re való pozitív teszt egyéni esélyeinek meghatározásában (4f. ábra).Összességében azoknál a résztvevőknél, akiknél a SARS-CoV-2-specifikus kapilláris T-sejtes válasz ≤23,7 pg/mL IFN-γ-ra 14,9%-os volt a fertőzés kockázata három hónap után, szemben a 141,6 pg/ml-nél nagyobb válaszlépéssel.ml IFN.A -γ fertőzés kockázata 4,4% volt (2. táblázat).
A SARS-CoV-2-re (a; *P = 0,034) és a SARS-CoV-2-re specifikus IgG-célzott receptorkötő doménre ("RBD") specifikus IFN-γ+ T-sejt-válaszok (b), 1. tüske alegység (' S1') (c), 2. tüske-alegység ('S2') (d) és nukleokapszidkötési reakció ('N') (e).A COVID-19 teszteken (PCR és/vagy laterális véráramlási teszt) pozitívnak bizonyult résztvevőknél minden fertőzés a vérvételt követő 3 hónapon belül következett be.Az összehasonlításokat kétirányú Mann-Whitney teszttel végeztük.Az adatok diagramok formájában jelennek meg (középvonal a mediánnál, felső határ a 75. percentilisnél, alsó határ a 25. percentilisnél), a minimális és maximális értékeken habarcsokkal.Minden pont egy donort jelöl.ns nem fontos.Az f hőtérkép a Spearman-féle rangkorrelációkat mutatja a megadott adatkészlet változói között.A statisztikailag nem szignifikáns összehasonlításokat kizártuk a mátrixból, és üres cellákkal jelöltük.A nyers adatok nyers adatfájlok formájában állnak rendelkezésre.
Ahogy a COVID-19 világjárvány következő szakaszába lépünk, a hangsúly a megelőzésről az egyéni kockázatkezelésre és a társadalom veszélyeztetett tagjainak azonosítására helyeződik át.A COVID-19 elleni immunitás korrelációinak megállapítása kritikus fontosságú e magas kockázatú csoportok hatékony azonosításához és kezeléséhez.Egyre több bizonyíték áll rendelkezésre arra vonatkozóan, hogy a T-sejtes immunitás védelmet nyújt a SARS-CoV-2 fertőzés ellen, és korlátozza a COVID-1910 súlyosságát.Az itt bemutatott adatok azt mutatják, hogy a SARS-CoV-2-specifikus IFN-γ+ T-sejt-válaszok tüske-, membrán- és nukleokapszid szerkezeti fehérjékkel szembeni együttes erőssége nagyobb védelmet nyújt a COVID-19 ellen, mint az antitestek megkötése.19 elősegíti vagy semlegesíti a válaszokat. .és figyelembe kell venni az egyéni és/vagy állományi immunitás értékelésekor.Az RNS-vírusok, mint például a SARS-CoV-2 vagy az influenza A vírus (IAV) elkerülik a szerológiai semlegesítést azáltal, hogy gyorsan fejlesztik a szabaddá tett B-sejt epitópokat az antitestek által felismert felületi antigéneken.A T-sejtek által biztosított védő immunválasz tükrözheti a vírusfehérjék konzerváltabb régióiból származó epitópok célba juttatását, amelyek nem tudnak gyorsan elkerülni az immunválaszt.Az új SARS-CoV-2 variánsokkal szembeni T-sejt-közvetített védelem hasonló az IAV22,23 altípusokban megfigyelhető konzervált belső fehérjék T-sejt-célzása által közvetített heteroszubtípusos védelemhez.
A COVID-19-re adott sejtes immunválasz mérésében rejlő óriási lehetőségek ellenére viszonylag kevés figyelmet fordítottak a pontos, nagy áteresztőképességű, szabványosított T-sejt-vizsgálatok kifejlesztésére.A T-sejtes válaszok mérésével kapcsolatos hagyományos bonyolultságok és költségek kizárják a T-sejtes immunitás pontos meghatározását a nagy populációs immunitás szűrése során.Míg a közelmúltban számos kereskedelmi forgalomban kapható teljes vér peptid-stimulációs vizsgálati eljárás vált elérhetővé, jelenleg mindenkinek szüksége van phlebotomistára a vérvételhez, ami korlátozza a rendelkezésre állást és a mértéket.A kapilláris vérrendszereket széles körben használják a SARS-CoV-2 antitestek populációban való előfordulásának meghatározására.A kapilláris vérvizsgálatokat úgy alakítottuk át, hogy teljes vér peptid-stimulációs vizsgálatokat végezzünk a T-sejtek SARS-CoV-2 szerkezeti fehérjékkel és a SARS-CoV-2 specifikus antitestválaszokkal szembeni reaktivitásának felmérésére.Valójában a SARS-CoV-2-specifikus antitestek és T-sejtek együttes mérése ugyanabban a kapilláris vérmintában nagyon vonzó: (i) csökkenti a résztvevőnként többszöri vérvizsgálat szükségességét, (ii) javítja a résztvevők tapasztalatait és megértését;(iii) javítja a logisztikát és csökkenti a párhuzamos munkavégzést, (iv) csökkenti a környezeti hatást, mivel kevesebb laboratóriumi fogyóeszközre és mintaszállításra van szükség.Bár az összesített IFN-γ reaktivitás hasonló volt az egyező vénás és kapilláris vérminták között, azt figyelték meg, hogy a résztvevők kapilláris vér kohorszában alacsonyabb (4a. ábra), mint a vénás vér kohorszában (2a. ábra).IFN-γ értékek Ennek a megállapításnak több magyarázata is van, nevezetesen, hogy nagyszámú, immunszuppresszív terápiát igénylő társbetegségben szenvedő résztvevőt vontak be a kapilláris vérmintavételi csoportba (1. táblázat), valamint az érrendszerből nyert T-sejtek életképességét és/vagy funkcióját. a minták alacsonyak lehetnek, különösen figyelembe véve a minták peptidstimuláció előtti hosszú távú tárolásának körülményeit.
A jelenleg széles körben elérhető COVID-19 oltóanyag biztosítja a legjobb védelmet a súlyos betegségek ellen a legtöbb recipiens számára az oltást követő 6 hónapon belül8.Biztató, hogy a SARS-CoV-26,7 variánsok vakcina által kiváltott gyenge szerológiai semlegesítése ellenére a vad típusú SARS-CoV-2 elleni vakcináció által kiváltott T-sejtes válaszok erősen reaktívak maradtak, mivel 25 másik változat is megjelent.Az itt bemutatott adatok bizonyítják a vakcina immunogenitásának szélesebb körű értékelésének fontosságát, kiemelve az elégtelen T-sejtes immunitással rendelkező vakcinákat a hirtelen fertőzés és a vírus tartós átvitelének megelőzésére.Azt is megfigyeltük, hogy sok, a kapilláris kohorszba toborzott, be nem oltott egyén szignifikáns választ adott a SARS-CoV-2-specifikus T-sejtekre (és az N-kötő IgG-re), függetlenül a korábbi oltástól, ami valószínűleg a korábbi fertőzésnek köszönhető.A megfelelő egyének beoltása helyett fertőzési kockázatukat az aktuális immunizálási állapotuk és a meghozott tájékozott döntések alapján kell felmérni.
A tanulmány korlátai közé tartozik annak biztosítéka, hogy a résztvevők saját maguk jelentették be a SARS-CoV-2 fertőzést a vérvétel után, hogy meghatározzák az immunitás jelentőségét;egyes résztvevők tünetmentes fertőzésben szenvedhetnek, és nem eshetnek át PCR- és/vagy laterális áramlási teszten a COVID-19 kimutatására.Adatkészletünkből hiányzott az információ a résztvevők vérvétel idején alkalmazott gyógyszereiről is.Ezen túlmenően, mivel valamennyi résztvevőnk csak enyhe/közepes tünetekről számolt be, vagy nem számolt be tünetekről, adatkészletünkből nem lehetett azonosítani azokat az immunválaszokat, amelyek a COVID-19 miatt súlyos megbetegedések és kórházi kezelések fokozott kockázatát jelezték előre.A nukleokapszid-specifikus epitópok elleni CD8+ T-sejt-válaszok jelenlétét azonban a közelmúltban összefüggésbe hozták a súlyos COVID-1926 elleni védelemmel.Ezenkívül az itt használt vizsgálat nem mérte a T-sejt-válaszokat specifikus korai expresszálódású SARS-CoV-2 nem strukturális fehérjékre, amelyekről a közelmúltban kimutatták, hogy elsősorban a szeronegatív egészségügyi dolgozókban halmozódnak fel, akik érintkezésbe kerültek fertőzött betegekkel.E munka alapján, figyelembe véve a közösségi átvitel gyakoriságát a toborzás idején, és a populációban a kontaktfertőzés nagy valószínűségét, a vizsgálataink során talált SARS-CoV-2 specifikus T-sejtek száma is képesnek tűnik a kiürülésre.szubklinikai fertőzések kohorszainkban.Végül nem mértük a T-sejtek interleukin 2 termelését, mert korábbi munkáink a SARS-CoV-214-specifikus T-sejt válaszok gyenge azonosítását mutatták, bár az IL-2-specifikus válaszok már meglévő keresztreaktivitást jelezhetnek.a SARS-CoV-211 fertőzés elleni védekezéssel kapcsolatos sejteket.
Összességében ezek az adatok rávilágítanak a hosszú távú longitudinális vizsgálatok alapvető szükségességére, amelyek a SARS-CoV-2-specifikus T-sejt-válaszokat beépítik a populációs léptékű immunitás mérésébe.Ezeket az erőfeszítéseket segítheti egy új kapilláris vérvizsgálat kifejlesztése, amely a T-sejtes választ méri.
A kutatási projekt 2021 februárja és 2022 márciusa között toborozta a résztvevőket. A vénás vérmintákat adományozó egészséges donorok csoportja (n = 148) elsősorban egyetemi dolgozókból és a Cardiffi Egyetem COVID-19 szűrőszolgálatában részt vevő hallgatókból, illetve egy általános iskola munkatársaiból állt. Cardiff.Minden résztvevő egyébként egészséges volt, és nem számolt be semmilyen immunszuppresszív gyógyszerről (a jellemzőkért lásd az 1. táblázatot).A kapilláris vérmintákat adományozó résztvevők csoportjába az Egyesült Királyság minden részéből származó összes önkéntes donor (18 év feletti) tartozott.2022. január 24. és március 14. között 342 résztvevőt vontak be a vizsgálatba, akik közül 299-en küldtek vérmintát a laboratóriumba.Sok résztvevő oltatlan maradt, és/vagy súlyos társbetegségekről számolt be, beleértve az autoimmun betegségeket és a rákot (a jellemzőket lásd az 1. táblázatban).Ez a tanulmány etikai jóváhagyást kapott a Newcastle és North Tyneside 2 Kutatási Etikai Bizottságtól (ID IRAS: 294246) és a Cardiff University School of Medicine Kutatási Etikai Bizottságától (SREC ref: SMREC 21/01).Minden résztvevő írásos beleegyezését adta a felvétel előtt.A résztvevők nem kaptak ellenszolgáltatást a vizsgálatban való részvételért.
A vénás vérmintákat 6 vagy 10 ml-es lítium- vagy nátrium-heparin-vacutainers (BD) vénapunkcióval vettük.A kapilláris vérmintákat ujjlancetával vettük, majd heparin mikrokonténerekbe (BD) gyűjtöttük.Legalább 400 µl vér szükséges;minden ennél kisebb mintát elutasítunk.A minta elutasításának egyéb okai közé tartozott a masszív koaguláció és/vagy hemolízis, valamint a viszkózus plazma elemzéshez való összegyűjtésének elmulasztása (5. kiegészítő ábra).Összesen 299 kapilláris vérminta állt rendelkezésre az antitestválaszok értékelésére, ebből 270 minta állt rendelkezésre a T-sejtes válaszok értékelésére is.
A SARS-CoV-2-specifikus T-sejt-válaszokat a COVID-19 Immuno-T vizsgálattal (ImmunoServ Ltd.) értékelték, és a korábban leírtak szerint hajtották végre14.Röviden, minden résztvevőtől egy 6 ml-es vagy 10 ml-es nátrium-heparin (BD) vénás vakutainert vettünk, és a vérvételt követő 12 órán belül a laboratóriumban feldolgoztuk.Bár a legtöbb mintát 24 órán belül feldolgozták, egy 400-600 μl heparinizált mikrovérzéses (BD) kapilláris vért vettünk az ujjbegy-mintavételt követő 48 órán belül.A vénás és/vagy kapilláris vérmintákat a SARS-CoV-2-re (vad típusú variánsra) specifikus külön peptidkészletekkel stimuláltuk, a korábban leírtak szerint14.Ez a peptidkönyvtár 420 15 tagú szekvenciát tartalmaz 11 átfedő aminosavval, amelyek a teljes tüskeproteint (S1 és S2) lefedik (S; NCBI fehérje: QHD43416 1), nukleokapszid foszfoproteint (NP; NCBI fehérje: QHD43423 2) és membrán (M glikoproteint) NCBI fehérje: QHD43419 1) kódoló szekvenciák (a továbbiakban: „S-/NP-/M-kombinatorikus peptidkönyvtár”).Az összes peptidet >70%-ra tisztítottuk, steril vízben oldottuk, és peptidenként 0,5 μg/ml végső koncentrációban használtuk fel.A mintákat 37 °C-on 20-24 órán át inkubáltuk.A csöveket ezután 5000xg-vel 3 percig centrifugáltuk, és minden vérminta tetejéről ~150 µl plazmát gyűjtöttünk.Tárolja a plazmamintákat -20°C-on legfeljebb egy hónapig, mielőtt citokin/antitest kimutatási vizsgálatokat végezne.
Az IFN-γ-t az IFN-γ ELISA MAX Deluxe Set (BioLegend, katalógusszám: 430116) segítségével mértük, és a gyártó utasításai szerint végeztük.Közvetlenül a leállító oldat (2 N H2SO4) hozzáadása után a mikrolemezt 450 nm-en olvastuk le BioLegend Mini ELISA lemezleolvasóval.Az IFN-y mennyiségét standard görbe extrapolációval határoztuk meg GraphPad Prism segítségével.Az assay alsó kimutatási határa alatti értékeket 7,8 pg/ml-ben, a vizsgálat felső kimutatási határa feletti értékeket 1000 pg/ml-ben rögzítettük.
Az anti-SARS-CoV-2 RBD/S1/S2/N IgG antitesteket Bio-Plex Pro Humán IgG SARS-CoV-2 4-plex panellel (Bio-Rad, katalógusszám: 12014634) mértük, és az alábbiak szerint jelöltük. a gyártó utasításait.utasítás .A mennyiségi meghatározási határ feletti értékeket jelző mintákat 1:1000 hígítással elemezték újra.A gyöngyök átlagos fluoreszcencia intenzitását Bio-Plex 200 készüléken (Bio-Rad) mértük.Az antitest-koncentrációkat a VIROTROL SARS-CoV-2 egyszeri kontrollvizsgálattal (Bio-Rad) számítottuk ki, és a gyártó kalibrációs faktora segítségével WHO/NIBSC 20/136 nemzetközi referencia standard egységekre (BAU/mL) konvertáltuk.
A SARS-CoV-2 vad típusú és delta (B.1.617) SARS-CoV-2 vonalak elleni RBD és S1 alegység-specifikus neutralizáló antitesteket a Bio-Plex Pro Human SARS-CoV-2 Variant Neutralization Antibody Kit (Bio) segítségével mérték. -Rad , cikkszám: 12016897), a gyártó utasításai szerint.Mérje meg az átlagos fluoreszcencia intenzitást a Bio-Plex 200 (Bio-Rad) készüléken, és számítsa ki a százalékos gátlást (vagyis a semlegesítést) a következő képlet segítségével:
A SARS-CoV-2 fertőzéses közömbösítési vizsgálatait a korábban leírtak szerint végeztük28.Röviden, 600 PFU vad típusú SARS-CoV-2-t inkubáltunk a plazma háromszoros sorozathígításaival két párhuzamosban 1 órán át 37 °C-on.Az elegyet ezután VeroE6 sejtekhez adtuk 48 órán át.A monorétegeket 4% paraformaldehiddel fixáltuk, 0,5% NP-40-nel permeabilizáltuk, és 1 órán át blokkoló pufferben (0,1% tweent és 3% fölözött tejet tartalmazó PBS) inkubáltuk.Primer antitestet (anti-nukleokapszid 1C7, Stratech) adtunk a blokkolópufferhez 1 órán át szobahőmérsékleten.Mosás után egy másodlagos antitestet (anti-egér IgG-HRP, Pierce) adtunk a blokkolópufferhez 1 órán át.Az egyrétegű rétegeket mostuk, Sigmafast OPD-vel előhívtuk, és Clariostar Omega lemezolvasón olvastuk le.Vírus nélküli, vírus nélküli, de antitestek nélküli üregeket és közepes aktivitást mutató normalizált szérumokat vettünk minden kísérletbe kontrollként.
A statisztikai elemzést GraphPad Prism (9.4.1-es verzió) segítségével végeztük.Az adathalmaz normalitását Shapiro-Wilk teszttel teszteltük.Minden összehasonlításnál nem paraméteres kritériumokat használtunk.A Mann-Whitney tesztet nem párosított mintákhoz alkalmaztuk.Minden teszt kétoldalas volt, P ≤ 0,05 névleges szignifikancia küszöbértékkel.
Az adatkészlet kezdeti feltáró elemzése R-ben (4.0.3-as verzió) történt.Ez magában foglalja a Spearman-féle egyváltozós rangkorrelációs mátrix kidolgozását, ahol a két változó közötti korrelációt a négyzetek mérete és színe reprezentálja.Az asszociációk közötti statisztikai szignifikanciát Spearman-féle rho segítségével számítottuk ki, ahol a ≤0,05 értékeket tekintettük szignifikánsnak.A statisztikailag nem szignifikáns összehasonlításokat kizártuk a mátrixból, és üres cellákkal jelöltük.A P-értékeket többszörös összehasonlításhoz igazították Holm-korrekcióval.Bináris logisztikus regressziós modellt használtak az adatkészlet változóinak a COVID-19-re adott pozitív válaszre gyakorolt ​​hatásának szimulálására.Az IFN-γ T-sejt válaszokat és az anti-RBD/S1/S2/N IgG titer pontszámokat faktorokká alakítottuk át, ahol minden egyedet a megfelelő kvartilishez rendeltük minden pontszámhoz.Ezt követően a statisztikai csomagban (V4.0.3) található glm függvény segítségével kidolgoztunk egy kezdeti kutatási modellt.Az ebből az eredeti modellből származó esélyhányadosokat a modell együtthatóiból az OddsPlotty csomag (V1.0.2) 'odds_plot' függvényével kinyertük.A keresztellenőrzési modell kidolgozásakor a bestglm csomag (V0.37.3) „bestglm” függvényét használtuk, hogy korlátozzuk a felhasználói torzítást, és biztosítsuk a prediktorok legjobb részhalmazának kiválasztását.A választott módszer „kimerítő” volt, és a modell illeszkedésének értékeléséhez használt információs kritérium az AIC volt.A fent leírt munkafolyamatot alkalmaztuk az esélyhányados meghatározásához.
A tanulmányok tervezésével kapcsolatos további információkért tekintse meg a cikkhez kapcsolódó természettanulmány-absztraktot.
A leveleket és az anyagokra vonatkozó kéréseket Dr. Martin Scarrnak vagy Andrew Godkin professzornak kell címezni.Ez a cikk az eredeti adatokat tartalmazza.
A statisztikai modellek létrehozásához használt R-kód kérés nélkül nyilvánosan elérhető29.Az újranyomtatási információk és a licencek a www.nature.com/reprints oldalon találhatók.
Munro, APS et al.Hét COVID-19 vakcina biztonságossága és immunogenitása harmadik dózisként ( emlékeztető oltás ) két adag ChAdOx1 nCov-19 vagy BNT162b2 (COV-BOOST) után az Egyesült Királyságban: 2. fázisú, vak, többközpontú, randomizált, kontrollált vizsgálat.Lancet 398, 2258–2276 (2021).
Stewart, ASV et al.A COVID-19 (Com-COV2) elleni heterológ elsődleges vakcinázás immunogenitása, biztonságossága és reaktogenitása mRNS-sel, vírusvektorokkal és fehérjeadjuváns vakcinákkal az Egyesült Királyságban: 2. fázisú, egyszeresen vak, randomizált vizsgálat, nem inferioritási teszt.Lancet 399, 36–49 (2022).
Lee, ARIB et al.A COVID-19 vakcinák hatékonysága csökkent immunitású betegeknél: szisztematikus áttekintés és metaanalízis.BMJ 376, e068632 (2022).
Dejnirattisai, W. et al.A SARS-CoV-2 mikronos B.1.1.529 variáns szérummal történő csökkentése immunizálás után.Lancet 399, 234–236 (2022).
Lipsich M, Krammer F, Regev-Yohai G, Lustig Y és Baliser RD Áttöréses fertőzés SARS-CoV-2 vakcinázott egyénekben: mérés, okok és következmények.Az immunológiai nemzeti pap.https://doi.org/10.1038/s41577-021-00662-4 (2021).
Levin, EG et al.Gyengült immunhumorális válasz a BNT162b2 Covid-19 vakcinára 6 hónapig.N. eng.J. Medicine.385, e84 (2021).
Carreño, JM et al.A lábadozó és vakcina szérumok aktivitása a SARS-CoV-2 Omicron ellen.Nature 602, 682–688 (2022).
Chemaitelly, H. et al.A katari mRNS vakcina SARS-CoV-2 Omicron BA.1 és BA.2 alvariánsok elleni védelmének időtartama.medrxiv https://doi.org/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022).
Tai, MZ et al.A memória B-sejtek gyakorisága csökken a COVID-19 delta vakcina áttöréses fertőzésével.Molekuláris gyógyászat EMBO.14, e15227 (2022).
Kundu, R. et al.A keresztreaktív memória T-sejtek a COVID-19-kontaktusok SARS-CoV-2 fertőzés elleni védelmével járnak.Nemzeti kommuna.13, 80 (2022).
Geurtsvan Kessel, CH et al.Megkülönböztető SARS CoV-2 omikron-reaktív T-sejt- és B-sejt-válaszok COVID-19-oltásban részesülőkben.a tudomány.Immunológia.https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo2202 (2022).
Gao, Yu et al.Az öröklött SARS-CoV-2-specifikus T-sejtek keresztben felismerik az Omicron variánsokat.Nemzeti orvoslás.28, 472–476 (2022).
Scarr, MJ et al.A SARS-CoV-2-specifikus T-sejtek teljes vérből történő mérése tünetmentes fertőzést és vakcina immunogenitását mutatja egészséges egyénekben és szilárd szervrákban szenvedő betegeknél Immunology https://doi.org/10.1111/imm.13433 (2021).
Tan, AT et al.A SARS-CoV-2 tüskés T-sejtek gyors mérése vakcinázott és természetesen fertőzött egyének teljes vérében.J. Clinical.befektetni.https://doi.org/10.1172/JCI152379 (2021).
Tallantyre, EU et al.A COVID-19 vakcina válasza sclerosis multiplexben szenvedő betegeknél.telepítés.Neuronok.91, 89–100 (2022).
Bradley RE et al.A Wiskott-Aldrich-szindrómával járó tartós COVID-19 fertőzés a terápiás védőoltás után eltűnt: esetjelentés.J. Clinical.Immunológia.42, 32–35 (2022).